ELISA检测锌转运蛋白8自身抗体（ZnT8A）在中国人群1型糖尿病诊断中的应用

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本研究中，ZnT8A单项标志物对诊断 T1D 的灵敏度为25.3%，特异性为99.6%（临界值15 U/ml）。通过 ELISA 检测 ZnT8A 的 ROC曲线如图1所示。曲线下面积（AUC）0.892（95% CI 0.853~0.930）表明该测试具有较高的准确性。

糖尿病抗体标准化计划(IASP)通过放射配体法检测ZnT8A，得到的 ROC-AUC 中位数为 0.848 [25]。Dunseath等[13] 在 1 型糖尿病患者和健康献血者中通过 ELISA 对 ZnT8A 进行 ROC 曲线分析，结果显示 AUC 为 0.80，灵敏度为 54%，特异性为 99%。

因此，我们推测ELISA的ZnT8A测试可能具有较高的准确性。此外，ELISA检测ZnT8A作为一种简便、可重复的方法，具有高度的特异性，可能适合更广泛的临床应用。

图 1 用于1型糖尿病的ZnT8抗体筛查试验的ROC曲线。

1. 糖尿病患者及健康对照组的ZnT8A检测结果

T1D患者的ZnT8A水平高于T2D患者和健康对照组。

2. T1D患者不同亚型的ZnT8A检测结果

“经典” 1 型糖尿病患者中 ZnT8A 的阳性检出率高于LADA患者（45.0 vs. 18.7%，p < 0.05）。与之前报道的文献一致[19]。“经典” 1 型糖尿病患者的 ZnT8A 水平高于 LADA 患者（中位数 14.00 vs, 13.42，Z =- 2.013，p = 0.044）。

1. 年龄

Lampasona [20] 报道，在 GADA 和/或 IA-2A 阳性的自身免疫年轻患者中 ZnT8A 阳性的检出率较高，并且随着年龄的增长而下降：在 0-49岁的受试者中阳性率为 12.2%；而在 49.1-58.8岁受试者中降至 6.6%；年龄> 58.9 岁的受试者中阳性率仅 4.4%。我们发现 ZnT8A 在 18 岁以下的T1D患者中的阳性检出率和抗体水平均最高，其余为 18-40 岁T1D患者和 40 岁以上T1D患者（p < 0.05）。后两者在ZnT8A 阳性率和 抗体水平上无显著差异。这与 Vaziri-Sani 等人先前发表的报告一致，他们发现2~17岁T1D患者的ZnT8A 水平显著高于15~34岁T1D患者。

另一项针对 15 岁以下新诊断为糖尿病的儿童和青少年的研究报告称，ZnT8A 阳性检出率与年龄较大有关 [22]。据报道，在中国和比利时的 T1D 患者中，ZnT8A 的检出率随着诊断年龄的增加而下降 [17, 23]。此外，在 T1D 发病后 6 个月内，法国6-10 岁儿童的 ZnT8A 检出率高于其他年龄较大的患者 [5]。本研究中，ZnT8A 阳性组的诊断年龄小于 ZnT8A 阴性组。然而，ZnT8A 检出率随着发病年龄的增长而增加，在 8-16 岁时达到一个平台，然后下降 [24]。综上所述，诊断年龄可能在 ZnT8A 检出率中起重要作用。

本研究ZnT8抗体的阳性率和抗体水平：

2. 地理、种族差异和疾病诊断标准

作为一种新型的β细胞特异性自身抗体，ZnT8A在T1D的筛选中具有广泛的临床应用价值[12]。ZnT8A 在全球T1D患者中的阳性率差异大（如下表）。LADA 患者中 ZnT8A 的不同检出率可能是受地理、种族差异和疾病诊断标准不同影响。在中国，LADA的诊断需要T1D的起病年龄≥18岁，而其他地区LADA的诊断通常需要T1D起病年龄≥30岁。本研究招募的 75% 的 T1D患者是 LADA 患者，“经典” T1D患者的比例非常小，可能会影响一些结果，例如 T1D患者中 ZnT8A 的检出率。

杨等人 [17] 发现糖尿病病程与受试者 ZnT8A 的检出率没有差异。本研究中 ZnT8A+ 和 ZnT8A- 的T1D患者的病程没有差异。也有不同结果的报道称：61% 的新发病的T1D患者 ZnT8A 呈阳性，而6 个月以上病程的 T1D 患者中ZnT8A检出率降至 33%[5]。由于 ZnT8A 水平从 T1D 的临床发病后呈指数级下降，本研究中 ZnT8A 的低检出率可能是由于纳入了病程较长的 T1D 患者。糖尿病病程与 ZnT8A 检出率之间的相关性值得进一步探索。同时，还需要一些纵向研究来动态监测中国 T1D 患者的 ZnT8A 水平。

Mbanya等人[28] 表明 ZnT8A 阳性糖尿病患者的 BMI 明显低于 ZnT8A 阴性患者。在本研究中同样观察到了类似的趋势，支持了更瘦的糖尿病患者可能更容易检测出ZnT8A 的观点。

ZnT8 具有高度β细胞特异性，ZnT8A引起的自身免疫损伤可能导致严重的胰岛素缺乏。芬兰的一项研究发现，与 ZnT8A 阴性的同龄人相比，ZnT8A 阳性儿童的血清 C 肽浓度较低，胰岛素治疗剂量较高，并且更容易发生酮症酸中毒 [22]。本研究中也发现了相同的趋势。因此，ZnT8A 阳性可能反映了一种侵袭性更强的T1D。

与 ZnT8A 阴性的T1D患者相比，ZnT8A 阳性 的T1D患者诊断时年龄较小 (p = 0.022)，BMI 较低 (p = 0.016)，酮症酸中毒更频繁 (p = 0.034)，更高的胰岛素治疗需求 (p = 0.041)。但两组的糖尿病病程、FBG、HbA1c 和血脂（胆固醇、甘油三酯、LDL-C 和 HDL-C）水平无显著差异。这一发现与 Mbanya 等人[28]和中国的另一项研究报告[17]的结论一致。

T1D 患者的病史、体征、代谢特征：

T1D患者抗体检测结果：

ZnT8A 作为 T1D 的一个额外且独立的预测标志物，在GADA、IA-2A、IAA 和 ICA均阴性的 T1D患者中的阳性检出率为26% [26]。此外，据报道，临床表型为 T2D 的患者中 ZnT8A 的阳性检出率为 1.99%，ZnT8A 检测可提高基于 GADA 和 IA-2A 阳性 LADA 的诊断检出率[27]。因此，ZnT8A检测可用于鉴别区分 LADA 和青年发病的T2D ，有助于 LADA 患者的精确诊断和早期胰岛素治疗方案的抉择。ZnT8A 水平与 GADA 水平相关（相关系数 = 0.447，p = 0.000）。ZnT8A 和 GADA 的组合将诊断灵敏度从 56.8%（GADA 阳性）提高到 64.2%。目前GADA 测试在中国基本已经普及，我们建议应尽快引入 ZnT8A检测。此外，之前有报道称 ZnT8A 与高 GADA 滴度相关 [20]。我们发现 ZnT8A 水平与 GADA 水平相关。

ZnT8A检测对于T1D和LADA患者的筛查具有重要的价值，该抗体的补充对于提高抗体检出率具有重要价值。ELISA检测ZnT8A作为一种简便易行的方法，可信度高，在T1D诊断中具有广泛的临床应用潜力。

原文文献：Qiu X ,   Ning C ,   Xiao L , et al. Zinc transporter 8 autoantibody (ZnT8A) by ELISA for diagnosing type 1 diabetes among Chinese people[J]. International Journal of Diabetes in Developing Countries, 2018.