天津阿斯尔生物科技有限公司

N-VGCC Ab RIA
中文名称 : N型电压门控钙通道自身抗体RIA检测试剂盒
生产厂家 : RSR Limited
货号 : N-VGC/25
规格 : 25T
适用病症 : Lambert-Eaton肌无力综合征
产品详情

1.预期用途:

RSR 公司的N 型电压门控钙通道(N-VGCC)自身抗体放射免疫法(N-VGCC Ab RIA)试剂盒专用于定量检测人血清中NVGCC 自身抗体(N-VGCCAb),仅供专业技术人员操作使用。


2.检测意义:

N-VGCC 反应的血清自身抗体最初在与Lambert-Eaton肌无力综合征(LEMS)特异性相关的神经肌肉接头功能障碍中被报道。随后,在中枢神经系统疾病,包括小脑变性和副肿瘤性自身免疫,特别是与小细胞肺癌(SCLC)相关的疾病中检测到N-VGCC 抗体。功能性N-VGCC由一个成孔的α1 亚基和辅助亚基βγα2/δ组成,广泛表达于中枢和外周神经系统。N-VGCC抗体主要与α1亚基结合。该试剂盒使用简单,为NVGCCAb 提供了一种特异而灵敏的检测方法,是对RiaRSRTMVGCCAb RIA 试剂盒的补充,用于检测P/Q VGCC 自身抗体。


3.试剂盒特性:

临床特异性:用本试剂盒对59名健康志愿者血清进行检测,5898.3%)均诊断为VGCC抗体阴性。

临床灵敏性:用本试剂盒对20例血清呈P/Q-VGCC抗体阳性的患者进行检测,6(30%)均被诊断为N-VGCC抗体阳性。

临界值:阴性≤ 110 pmol/L; 阳性 >110 pmol/L


4.样本要求:

15µL 血清/人份(1:10稀释后每管为50 µL,避免使用脂血、溶血及血浆样本。


5.组分性状:

        25孔板,液体和冻干粉。


6.检测原理:

RSR VGCC自身抗体放免法试剂盒采用放射免疫沉淀法原理,将从兔小脑提取的P型VGCC蛋白复合物,并经过表面活性剂增溶及125I -ω-芋螺毒素MVIIC标记,形成125I-VGCC(放射标记抗原)。患者血清中VGCC 自身抗体与检测抗原相结合后,同抗人免疫球蛋白G抗体形成免疫沉淀。免疫沉淀物的放射量与血清样本中抗体水平成正比,即自身抗体的浓度越高,免疫沉淀物的放射性就越强。


7.     实验步骤:

使用前所有试剂组分(除缓冲液外)需室温放置(20-25 ℃)至少 30 分钟。

加样:

50 μL阴性质控品(B)(直接使用,不用稀释)、阳性质控品(C 1-2) (直接使用,不用稀释)和稀释的患者血清(用缓冲液1: 10稀释)

加样:

50 μL 125I标记的N-VGCC(A) (新鲜复溶)加入每个管子和两个额外的空管中用于总计数。

试管:

盖好试管,使用旋涡混合器轻轻混匀。

孵育:

2-8 ℃下,16-20 小时

加样:

每管(不包括两个总计数管)加入50 μL抗人IgG(D)

试管:

盖好试管,使用旋涡混合器轻轻混匀。

孵育:

2-8 ℃下,1.5 小时

加样:

每管(不包括两个总计数管)加入1 mL冷的缓冲液(E)

试管:

使用旋涡混合器轻轻混匀

试管:

4℃ 1500 g 离心 20 分钟

试管:

弃去上清液

加样:

每管(不包括两个总计数管)加入1 mL冷的缓冲液(E)

试管:

旋涡混合器重悬沉淀

试管:

4 ℃ 1500 g 离心 20 分钟

试管:

弃去上清液

使用γ射线计数仪对每管计数 1分钟


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